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植物可溶性糖檢測(cè)試劑盒說明書

點(diǎn)擊下載該文件    日期:2015/7/14 11:32:41

植物可溶性糖檢測(cè)試劑盒說明書


植物可溶性糖檢測(cè)試劑盒說明書
 
(規(guī)格:50T/48樣      蒽酮比色法)
一、測(cè)定意義:
糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的中藥組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)?偺鞘侵笜悠分械倪原單糖及在本法測(cè)定條件下能水解成還原丹堂的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。
二、測(cè)定原理:
蒽酮比色法?捎糜诳扇苄詥翁,寡糖和多糖的含量測(cè)定,具有靈敏度高、簡(jiǎn)便快捷、使用微量樣品的測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。
三、儀器設(shè)備:
可見分光光度計(jì)、沸水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、微量移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、蒸餾水等。
四、試劑組成:(50T/48樣)
試劑一:粉劑x1瓶,4℃避光保存;
試劑二:10mLx1瓶,4℃保存;
工作液的配制:1瓶試劑一粉劑中加入5mL試劑二,充分溶解,如較難溶解,可適當(dāng)加熱攪拌;配好的工作液4℃可保存一周。
五、操作步驟;
1、可溶性糖的提取:稱取0.1-0.2g樣本,加入1mL蒸餾水研磨成勻漿,倒入有蓋離心管中,沸水浴10min(蓋緊,管蓋上扎一個(gè)小孔,以減少水分散失),冷卻后,8000g,常溫離心10min,取上清液10mL試管中,用蒸餾水定容至10mL,搖勻備用。
2、操作表:
試管
空白管
測(cè)定管
樣本(uL)
 
200
蒸餾水(uL)
400
200
工作液(uL)
100
100
濃硫酸(uL)
1000
1000
混勻,置沸水浴(95-100℃)中10min(蓋緊,管蓋上扎一小孔,以減少水分散失),流水冷卻,波長(zhǎng)620nm,測(cè)定各管吸光度值(A=A測(cè)定管-A空白管
注:1、空白管一般只做1-2管。
2、用A大于1,需要將樣品用蒸餾水稀釋后測(cè)定,計(jì)算時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋管。
3、由于濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性,請(qǐng)謹(jǐn)慎操作;測(cè)定采用硬質(zhì)塑料離心管或者玻璃試管,若采用玻璃試管可用塑料薄膜封住試管口,并用薄膜上扎一個(gè)小孔維持氣壓并減少反應(yīng)液揮發(fā)。
六、計(jì)算公式:
1、保準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。
2、按樣本鮮重量計(jì)算:
3、按樣本蛋白濃度計(jì)算:
注::加入樣本體積,0.2ml;
    :加入提取液體積,10ml;
    :樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;
     W:樣本重量;

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